TRH-R1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m2): sc-423506-KO-2

개요

Trhr는 시상하부의 TRH에 결합하는 A군 GPCR인 갑상선자극호르몬 방출호르몬 수용체 1(TRH-R1)을 암호화하며, 뇌하수체–갑상선 축 신호전달과 대사에 대한 신경내분비 조절을 조절한다. 리간드가 결합하면 TRH-R1은 주로 Gq/11과 연계되어 포스포리파아제 C를 활성화하고, 그 결과 IP3/DAG가 생성되며 세포내 Ca2+ 동원과 단백질 키나아제 C(PKC) 의존적 전사 프로그램이 유도된다. 마우스에서는 TRH-R1 신호가 MAPK/ERK 경로와도 교차하며, TRH에 반응하는 조직에서 흥분성과 호르몬 분비에 영향을 준다. TRH–TRH-R1 신호의 이상 조절은 갑상선자극호르몬(TSH) 역동성 변화 및 보다 광범위한 내분비·대사 표현형과 연관된 것으로 보고되어, 신경내분비 항상성의 기전을 연구하는 데 활용 근거를 제공한다.

TRH-R1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)는 mouse 세포주에서 Trhr 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Trhr 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Trhr의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TRH-R1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TRH-R1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Trhr 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TRH-R1 기능에 중요한 Trhr 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Trhr 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TRH-R1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TRH-R1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Trhr 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TRH-R1 HDR 플라스미드 (m) 및 TRH-R1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Trhr 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Trhr 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.