TRAPPC10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406491

Visão geral

O TRAPPC10 codifica uma subunidade central do complexo TRAPP (transport protein particle), que dá suporte à ancoragem de vesículas e ao tráfego de membranas ao longo do início da via secretória e do sistema endomembranar. Por seu papel na coordenação do transporte vesicular e de etapas de tráfego associadas ao Golgi e ao retículo endoplasmático (RE), o TRAPPC10 contribui para a triagem intracelular de proteínas, a homeostase de organelas e a entrega de cargas necessária para a fisiologia celular normal. A disrupção de componentes do complexo TRAPP pode perturbar o fluxo da via secretória e as respostas ao estresse, tornando o TRAPPC10 relevante para estudos mecanísticos de sinalização dependente de tráfego e de programas de manutenção celular. Alterações no transporte vesicular também estão implicadas em fenótipos do neurodesenvolvimento e neurodegenerativos, posicionando o TRAPPC10 como um alvo útil para modelar, em células humanas, mecanismos de doença ligados ao tráfego.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TRAPPC10 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TRAPPC10 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TRAPPC10, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TRAPPC10 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TRAPPC10.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TRAPPC10 para a investigação da sinalização de TRAPPC10, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TRAPPC10 críticos para a função TRAPPC10
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TRAPPC10 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TRAPPC10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TRAPPC10 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TRAPPC10. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TRAPPC10 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TRAPPC10 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TRAPPC10 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TRAPPC10 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.