TRAP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402963

概要

TGFBRAP1 は、トランスフォーミング増殖因子β受容体関連タンパク質1（TRAP-1）をコードしており、TGF-βスーパーファミリーのシグナル伝達を調節することに関与する細胞質アダプタータンパク質として知られています。TRAP-1 は TGF-β受容体複合体の構成要素と会合し、増殖、分化、細胞外マトリックスのリモデリング、免疫関連遺伝子プログラムを制御する下流のSMAD依存性転写応答に影響を与えることが報告されています。経路出力や受容体近傍での事象を形作る役割を通じて、TGFBRAP1 はシグナル伝達のクロストークや細胞状態の遷移という観点から研究されています。TGF-β経路の制御異常は、線維化、がん生物学、炎症性疾患の機序に広く関与するため、TRAP-1 は経路のメカニズム研究に有用な標的となっています。

TRAP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTGFBRAP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TGFBRAP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TGFBRAP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TRAP-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TRAP-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TGFBRAP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TRAP-1の機能に不可欠なTGFBRAP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TGFBRAP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TRAP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTRAP-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TGFBRAP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TRAP-1 HDRプラスミド（h）および TRAP-1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTGFBRAP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTGFBRAP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。