TRAF2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400361-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRAF2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRAF2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TRAF2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TRAF2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRAF2 Anticorpo (F-2): sc-136999
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRAF2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400361-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRAF2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400361-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRAF2 (fator associado ao receptor de TNF 2) é uma proteína adaptadora e uma ligase E3 de ubiquitina que conecta a sinalização da superfamília de receptores de TNF a vias transcricionais e de resposta ao estresse a jusante. Por meio de interações com motivos de ligação a TRAF e da regulação da ubiquitinação ligada a K63, o TRAF2 ajuda a coordenar a ativação das cascatas de NF-κB e MAPK, moldando respostas de citocinas, resistência à apoptose e a homeostase celular. Sua atividade interage com complexos de sinalização dependentes de RIPK1 e influencia a comunicação cruzada entre a sinalização inflamatória e programas de morte celular. A desregulação da sinalização de TRAF2 tem sido implicada em alterações da regulação imune e no remodelamento de vias oncogênicas, tornando-o um nó útil para estudos mecanísticos de fenótipos associados à inflamação.
TRAF2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TRAF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TRAF2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TRAF2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TRAF2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.