TPST-2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423487

개요

Tpst2는 티로실단백질 설포트랜스퍼레이스 2(TPST-2)를 암호화하며, TPST-2는 골지체에 존재하는 효소로서 PAPS를 황산기 공여체로 사용해 분비 단백질과 막 단백질의 번역 후 티로신 O-황산화를 촉매합니다. 이 변형은 단백질–단백질 상호작용과 수용체–리간드 인식을 형성하여 케모카인 신호전달, 백혈구 이동(trafficking) 및 기타 세포외 커뮤니케이션 과정에 영향을 미칩니다. TPST-2 활성은 여러 펩타이드 호르몬과 세포부착 분자의 적절한 성숙과 기능에 기여하며, Tpst2 의존적 황산화를 면역 및 내분비 항상성과 연결합니다. 티로신 황산화의 조절 이상은 염증 신호전달 변화 및 생식 관련 표현형과 연관된 바 있어, Tpst2는 마우스 모델에서 황산화 의존적 신호 네트워크를 연구하는 데 유용한 지점으로 여겨집니다.

TPST-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tpst2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tpst2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tpst2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TPST-2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TPST-2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tpst2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TPST-2 기능에 중요한 Tpst2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tpst2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TPST-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TPST-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tpst2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TPST-2 HDR 플라스미드 (m) 및 TPST-2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tpst2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tpst2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.