Topo IIIβ CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423472

개요

Top3b는 DNA 토포이소머레이스 III 베타(Topo IIIβ)를 암호화하며, 이는 게놈 유지 과정에서 발생하는 위상학적 스트레스와 재조합 중간체를 해소하는 type IA 토포이소머레이스입니다. 마우스 세포에서 Topo IIIβ는 DNA 수선, 복제 연관 스트레스 반응, RNA 대사 조절 등에서의 역할을 통해 핵산 무결성을 보존하는 데 관여하는 것으로 알려져 있으며, 이는 DNA와 RNA 모두를 기질로 작용할 수 있는 능력과도 일치합니다. 이러한 기능은 전사-복제 충돌 및 재조합에 의해 좌우되는 게놈 안정성 조절 경로와 교차하며, 이는 세포 항상성에 영향을 미치는 과정들입니다. Top3b 의존적 핵산 처리 기능의 교란은 게놈 불안정성 표현형과 연관되어 왔고, 모델 시스템에서 신경발달 및 암 관련 기전 연구와도 관련성이 있습니다.

Topo IIIβ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Top3b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Top3b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Top3b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Topo IIIβ 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Topo IIIβ 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Top3b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Topo IIIβ 기능에 중요한 Top3b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Top3b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Topo IIIβ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Topo IIIβ CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Top3b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Topo IIIβ HDR 플라스미드 (m) 및 Topo IIIβ HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Top3b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Top3b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.