Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
TNF-R2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423443
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TNF-R2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TNF-R2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TNF-R2 Anticorpo (D-2): sc-8041
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TNF-R2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423443 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Tnfrsf1b codifica o TNF-R2 (TNFRSF1B), um receptor de TNF expresso predominantemente em populações de células imunes, endoteliais e em certos tipos de células estromais, que responde preferencialmente ao TNF ligado à membrana. A sinalização do TNF-R2 recruta proteínas adaptadoras para regular a atividade das vias NF-κB e MAPK, moldando programas de sobrevivência celular, respostas de citocinas e remodelamento tecidual. Na biologia dos linfócitos, o TNF-R2 está intimamente ligado à estabilidade das células T reguladoras e à sinalização induzida por ativação que modula o equilíbrio inflamatório. A atividade desregulada do eixo TNF-R2 tem sido implicada em modelos de inflamação crônica, autoimunidade e processos neuroinflamatórios, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos sobre a especificidade da via do TNF.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TNF-R2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tnfrsf1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tnfrsf1b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tnfrsf1b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TNF-R2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tnfrsf1b para a investigação da sinalização de TNF-R2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tnfrsf1b críticos para a função TNF-R2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tnfrsf1b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TNF-R2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TNF-R2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tnfrsf1b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TNF-R2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TNF-R2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tnfrsf1b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tnfrsf1b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.