Date published: 2026-7-19

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TNF alpha Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423433-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: mouse
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • TNF alphaO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase TNF alpha (m) e o Plasmídeo Double Nickase TNF alpha (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Tnf. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TNF alpha Anticorpo (TN3-19.12): sc-12744
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    TNF alpha Plasmídeo duplo de Nickase (m)

    sc-423433-NIC
    20 µg
    $410.00

    TNF alpha Plasmídeo duplo de Nickase (m2)

    sc-423433-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    O gene **Tnf** em camundongo codifica o fator de necrose tumoral alfa (TNFα), uma citocina pró-inflamatória pleiotrópica produzida principalmente por macrófagos ativados, células T e outras populações da imunidade inata. O TNFα sinaliza por meio de **TNFR1** e **TNFR2** para regular as cascatas **NF-κB** e **MAPK**, controlando assim a indução de citocinas, o recrutamento de leucócitos, a sobrevivência celular e vias de morte celular programada, incluindo apoptose e necroptose. Como um nó central na sinalização inflamatória, o TNFα molda o remodelamento tecidual, a ativação vascular e a homeostase imunológica, sendo amplamente estudado em contextos de autoimunidade, infecção, inflamação metabólica e neuroinflamação. A atividade desregulada de **Tnf** está associada a fenótipos inflamatórios crônicos e a alterações no crosstalk entre a imunidade inata e adaptativa em modelos murinos de doença.

    TNF alpha O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tnf em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tnf. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tnf. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tnf interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.