TMEM70 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-412399

개요

TMEM70는 산화적 인산화 복합체 V(ATP 합성효소)의 올바른 조립과 안정화에 필수적인 미토콘드리아 내막 단백질을 암호화하며, 효율적인 ATP 생성과 미토콘드리아 에너지 항상성 유지에 기여합니다. TMEM70의 결손 또는 기능 이상은 양성자 결합형 ATP 합성을 교란하여, 미토콘드리아 막전위 변화, 호흡사슬 기능 장애, 그리고 이를 보상하기 위한 대사 재프로그래밍을 유발하는 경우가 많습니다. 따라서 TMEM70는 인간 세포에서 미토콘드리아 생합성, 생체에너지 대사, 그리고 미토콘드리아-핵(미토핵) 협응을 연구하는 데 유용한 핵심 지점입니다. 병원성 TMEM70 변이는 복합체 V 결핍과 함께 뇌심장근병증 및 대사성 악화(디컴펜세이션)와 같은 표현형을 보이는 상염색체 열성 미토콘드리아 질환과 연관되어 있어, 관련 세포 모델에서의 기전 연구 필요성을 뒷받침합니다.

TMEM70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TMEM70 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TMEM70 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TMEM70의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TMEM70 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TMEM70 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TMEM70 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TMEM70 기능에 중요한 TMEM70 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TMEM70 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TMEM70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TMEM70 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TMEM70 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TMEM70 HDR 플라스미드 (h) 및 TMEM70 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TMEM70 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TMEM70 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.