TMEM132B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414044

Visão geral

TMEM132B codifica uma proteína transmembrana de passagem única da família TMEM132, enriquecida no sistema nervoso e associada à organização de membranas e a interações célula–célula/MEC (matriz extracelular). Estudos recentes implicam proteínas TMEM132 no acoplamento ao citoesqueleto e em processos relacionados à adesão que influenciam o crescimento de neuritos, a conectividade sináptica e a morfologia celular. A expressão de TMEM132B e sua variação genética têm sido investigadas em contextos neurodesenvolvimentais e neuropsiquiátricos, sustentando sua relevância para estudar vias que moldam a formação e a manutenção de redes neuronais. A investigação funcional de TMEM132B pode ajudar a esclarecer como o arcabouço transmembrana se integra a módulos de sinalização que regulam a diferenciação neuronal e a remodelação responsiva ao estresse.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TMEM132B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TMEM132B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TMEM132B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TMEM132B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TMEM132B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TMEM132B para a investigação da sinalização de TMEM132B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TMEM132B críticos para a função TMEM132B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TMEM132B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TMEM132B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo TMEM132B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TMEM132B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TMEM132B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR TMEM132B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TMEM132B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TMEM132B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.