TLK2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405426-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TLK2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TLK2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TLK2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TLK2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TLK2 Anticorpo (E-12): sc-393506
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TLK2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405426-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TLK2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405426-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A tousled-like kinase 2 (TLK2) é uma quinase de serina/treonina que atua na regulação da cromatina e na manutenção do genoma durante a replicação do DNA e a progressão do ciclo celular. A TLK2 fosforila substratos envolvidos na montagem de nucleossomos e na atividade de chaperonas de histonas, conectando a remodelação de cromatina acoplada à replicação à sinalização de danos no DNA e à recuperação. Por meio dessas funções, a TLK2 influencia as respostas ao estresse replicativo, o controle de checkpoints e a manutenção da integridade epigenética. Alterações na atividade ou na dosagem de TLK2 têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e investigadas em contextos nos quais dinâmicas de cromatina perturbadas e instabilidade genômica contribuem para mecanismos de doença.
TLK2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TLK2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TLK2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TLK2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TLK2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.