TFIIIB90-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405826

개요

BRF1은 전사인자 IIIB의 TFIIIB90-1 소단위를 암호화하며, tRNA, 5S rRNA 및 기타 작은 비암호화 RNA의 전사에 필요한 RNA 중합효소 III(Pol III) 전사 개시 기구의 핵심 구성요소입니다. TFIIIB90-1은 Pol III 프로모터에서 TBP 및 BDP1과 함께 복합체를 형성함으로써 염색질 결합, 전사 전 개시 복합체(preinitiation complex) 형성, 그리고 세포의 번역 능력과 성장 프로그램의 조절을 지원합니다. Pol III의 산출량은 영양 감지 및 증식 신호전달과 밀접하게 연동되어 있어, BRF1의 기능은 리보솜 생합성, 단백질 항상성(proteostasis), 스트레스 적응과도 연결됩니다. Pol III 전사의 조절 이상과 TFIIIB 활성 변화는 비정상적인 생합성 수요 및 세포주기 조절이 특징인 종양성 상태와 기타 질환에서 흔히 관찰됩니다.

TFIIIB90-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 BRF1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 BRF1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 BRF1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TFIIIB90-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TFIIIB90-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 BRF1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TFIIIB90-1 기능에 중요한 BRF1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 BRF1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TFIIIB90-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TFIIIB90-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 BRF1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TFIIIB90-1 HDR 플라스미드 (h) 및 TFIIIB90-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 BRF1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 BRF1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.