TESPA1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406563

Descripción general

TESPA1 (thymocyte-expressed, positive selection-associated 1) codifica una proteína adaptadora enriquecida en células linfoides que coordina la transducción de señales aguas abajo de los receptores de antígeno. En las células T, TESPA1 contribuye a la señalización proximal del TCR y a la movilización de calcio al vincular la activación del receptor con vías dependientes de PLCγ y la liberación de Ca²⁺ desde el retículo endoplásmico, moldeando así los programas de activación y la selección de timocitos. También se ha implicado en la señalización del receptor de células B y en redes más amplias de comunicación entre células inmunitarias que influyen en las respuestas de citocinas y la diferenciación. La actividad alterada de TESPA1 se ha asociado con fenotipos de desregulación inmunitaria, incluida la susceptibilidad a mecanismos de enfermedad autoinmune e inflamatoria, lo que lo hace relevante para estudiar los umbrales de señalización y la función de los linfocitos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO TESPA1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen TESPA1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del TESPA1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de TESPA1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína TESPA1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en TESPA1 para la investigación de la señalización de TESPA1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de TESPA1 críticos para la función de TESPA1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de TESPA1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido TESPA1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido TESPA1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus TESPA1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR TESPA1 (h) y el plásmido HDR TESPA1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología TESPA1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana TESPA1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.