TESK2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432964

Visão geral

A quinase 2 associada aos testículos (TESK2), codificada pelo gene murino **Tesk2**, é uma quinase de serina/treonina que regula a dinâmica do citoesqueleto de actina ao fosforilar e inibir a cofilina, influenciando assim a renovação dos filamentos, a forma celular e a motilidade. A atividade da TESK2 conecta sinais de vias a montante, incluindo vias de GTPases da família Rho, a processos de remodelação do citoesqueleto que afetam adesão, migração e tráfego vesicular. A sua expressão é enriquecida em tecidos testiculares e em células germinativas, sustentando funções na espermatogénese e na reorganização do citoesqueleto durante a maturação das células germinativas. A desregulação da sinalização de TESK2 e a remodelação de actina dependente de cofilina são frequentemente investigadas em modelos de migração celular alterada e de arquitetura tecidular, sendo relevantes para estudos mecanísticos de perturbações do desenvolvimento e proliferativas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TESK2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tesk2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tesk2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tesk2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TESK2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tesk2 para a investigação da sinalização de TESK2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tesk2 críticos para a função TESK2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tesk2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TESK2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TESK2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tesk2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TESK2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TESK2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tesk2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tesk2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.