TCL-1B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407297

概要

TCL1BはTCL-1ファミリーに属するTCL-1Bをコードしており、リンパ系細胞の増殖と生存を制御する細胞内シグナル伝達の調節に関与するとされています。TCL-1ファミリータンパク質は、AKT/PKB依存的経路の制御や、それに下流で連動する転写プログラム（増殖、アポトーシス、代謝適応に影響）との関連が報告されています。TCL1ファミリーの異常発現は、造血器腫瘍やB細胞・T細胞の機能異常の文脈でしばしば研究されており、シグナル伝達の閾値変化ががん化や病勢進行に寄与し得ます。そのためTCL1Bは、免疫細胞モデルやがん細胞モデルにおけるシグナルネットワークの再配線や系統特異的な脆弱性を解析するための分子ツールとして用いられています。

TCL-1B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTCL1B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TCL1B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TCL1Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TCL-1Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TCL-1Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TCL1B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TCL-1Bの機能に不可欠なTCL1Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TCL1Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TCL-1B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTCL-1B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TCL1B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TCL-1B HDRプラスミド（h）および TCL-1B HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTCL1Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTCL1B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。