TCF7L2/TCF4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400607-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TCF7L2/TCF4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TCF7L2/TCF4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TCF7L2/TCF4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TCF7L2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TCF7L2/TCF4 Anticorpo (D-4): sc-166699
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TCF7L2/TCF4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400607-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TCF7L2/TCF4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400607-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TCF7L2 (também conhecido como TCF4) codifica um fator de transcrição da família “high-mobility group” (HMG) box que atua como um efetor nuclear central da sinalização canônica Wnt/β-catenina. Ao formar complexos com a β-catenina e co-reguladores, o TCF7L2 modula programas transcricionais que controlam decisões de destino celular, proliferação e diferenciação em múltiplos contextos teciduais, incluindo o epitélio intestinal e o pâncreas endócrino. A regulação dependente de TCF7L2 influencia a acessibilidade da cromatina e integra sinais de vias de desenvolvimento e metabólicas para moldar a expressão gênica específica de cada contexto. Variações genéticas e atividade desregulada de TCF7L2 têm sido associadas a características metabólicas e ao risco de diabetes tipo 2, e a saída transcricional aberrante de Wnt/TCF é frequentemente investigada em câncer e biologia de células-tronco.
TCF7L2/TCF4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TCF7L2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TCF7L2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TCF7L2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TCF7L2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.