Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO TCF-1 (h): sc-401584
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- TCF-1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique TCF-1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TCF-1 Antibody (C-5): sc-271453
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO TCF-1 (h) | sc-401584 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
TCF7 code pour TCF-1, un facteur de transcription à boîte HMG restreint aux lymphocytes T, qui intègre la signalisation canonique Wnt/β-caténine à des programmes géniques spécifiant la lignée. TCF-1 façonne le développement des thymocytes, soutient le maintien des progéniteurs T et régule les choix de différenciation par une activation ou une répression transcriptionnelle dépendante du contexte, en coopération avec des cofacteurs tels que la β-caténine et Groucho/TLE. Dans les lymphocytes matures, TCF-1 influence l’équilibre entre états effecteurs et états associés à la mémoire, et contribue aux réseaux chromatiniens et transcriptionnels qui gouvernent l’homéostasie immunitaire. La dérégulation des programmes dépendant de TCF7/TCF-1 a été associée à une différenciation altérée des cellules immunitaires et est étudiée dans le contexte des pathologies à médiation immunitaire ainsi que du remodelage transcriptionnel associé aux hémopathies malignes.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO TCF-1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène TCF7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du TCF7, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert TCF7 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine TCF-1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en TCF7 pour l'étude de la signalisation de TCF-1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de TCF7 essentiels à la fonction de TCF-1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de TCF7 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le TCF-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le TCF-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus TCF7. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le TCF-1 plasmide HDR (h) et le TCF-1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie TCF7 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles TCF7 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.