TBX6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405632

概要

TBX6はT-boxファミリーの転写因子をコードし、ヒト初期発生において中胚葉の指定および傍側中胚葉のパターニングを制御し、体節形成と椎骨分節を駆動する遺伝子プログラムを協調的に調節します。TBX6は、Notch経路やWNT/β-カテニン経路などの発生シグナル入力を統合する転写ネットワークの中で機能し、系譜のコミットメントと体軸の組織化を制御します。TBX6の発現量（用量）や機能の変化は、先天性の脊椎・肋骨奇形と関連することが報告されており、椎骨発生の遺伝的基盤を研究するうえで有用な結節点（ノード）となります。細胞モデルでは、TBX6の攪乱は、分化の軌跡、エンハンサーの制御原理、転写因子に駆動される細胞運命決定を検討するために一般的に用いられます。

TBX6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTBX6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TBX6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TBX6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TBX6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TBX6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TBX6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TBX6の機能に不可欠なTBX6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TBX6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TBX6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTBX6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TBX6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TBX6 HDRプラスミド（h）および TBX6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTBX6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTBX6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。