Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
TBL1XR1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401998
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TBL1XR1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico TBL1XR1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TBL1XR1 Antibody (L-08): sc-100908
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TBL1XR1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-401998 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
TBL1XR1 (transducin β-like 1 X-linked receptor 1) codifica un coregolatore contenente ripetizioni WD40 che opera all’interno dei complessi di repressione trascrizionale NCoR/SMRT e partecipa a uno scambio dinamico tra repressione e attivazione nelle regioni promotrici e negli enhancer. Collega i macchinari regolatori associati alla cromatina a programmi trascrizionali dipendenti dal segnale, inclusi i percorsi a valle dei recettori nucleari e della segnalazione Wnt/β-catenina, influenzando così decisioni di destino cellulare, proliferazione e differenziamento. Grazie ai suoi ruoli nel controllo trascrizionale e nel reclutamento di cofattori, TBL1XR1 è stato implicato in stati trascrizionali oncogenici e in fenotipi neuroevolutivi riportati in studi genetici. La perturbazione di TBL1XR1 può quindi essere utilizzata per indagare la regolazione genica dipendente dalla cromatina, la stabilità delle reti trascrizionali e il cross-talk tra vie di segnalazione in modelli cellulari umani.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TBL1XR1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TBL1XR1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TBL1XR1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TBL1XR1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TBL1XR1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TBL1XR1 per lo studio della segnalazione di TBL1XR1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni TBL1XR1 critici per la funzione di TBL1XR1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TBL1XR1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal TBL1XR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TBL1XR1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TBL1XR1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal TBL1XR1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TBL1XR1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TBL1XR1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TBL1XR1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.