TAZ 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-430168-NIC

생쥐 Wwtr1 유전자는 Hippo 경로의 핵심 하위 효과기로서, 기계적 신호, 세포 밀도, 그리고 세포골격 역학을 통합해 증식·생존·분화를 조절하는 유전자 프로그램을 조정하는 전사 공동활성인자 TAZ를 암호화한다. TAZ는 TEAD 계열 전사인자들과의 상호작용을 통해 상피–간엽 가소성, 줄기/전구세포의 거동, 그리고 기관 크기 조절을 조율한다. TAZ 활성이 비정상적으로 조절되면 조직 항상성이 변화하고 종양성에 가까운 전사 상태와 연관되므로, Wwtr1은 성장 조절 네트워크를 탐구하는 데 널리 활용되는 핵심 표적이다. 생쥐 모델에서는 Wwtr1/TAZ를 교란해 발달 신호 간 크로스토크와 맥락 의존적 전사 조절을 분석하는 연구가 자주 수행된다.

TAZ 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Wwtr1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Wwtr1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Wwtr1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Wwtr1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.