TADA2B Plasmide Double Nickase (h): sc-406224-NIC

TADA2B codifica una componente adattatrice trascrizionale dei complessi coattivatori SAGA/ATAC con attività di acetiltransferasi degli istoni, collegando fattori di trascrizione specifici per sequenza alla macchina di modifica della cromatina. Attraverso interazioni con GCN5/PCAF e subunità correlate, TADA2B contribuisce all’acetilazione degli istoni, all’accessibilità dei promotori e alla regolazione coordinata di programmi di espressione genica coinvolti nel controllo del ciclo cellulare, nella differenziazione e nelle risposte allo stress cellulare. L’alterazione dell’integrità dei complessi SAGA/ATAC può compromettere la regolazione epigenetica e l’omeostasi trascrizionale, processi spesso implicati nella trasformazione oncogenica e in altri disturbi della regolazione genica. In quanto regolatore associato alla cromatina, TADA2B è rilevante per studiare i meccanismi che collegano l’acetilazione degli istoni all’avvio della trascrizione e alla comunicazione tra enhancer e promotore nelle cellule umane.

TADA2B Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TADA2B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TADA2B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TADA2B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TADA2B interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.