T3JAM CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405338

概要

TRAF3IP3（T3JAM）は、免疫細胞シグナル伝達に関与するアダプター様タンパク質であり、受容体近傍で起こるイベントを下流のキナーゼカスケードへとつなぐことで、活性化・生存・分化プログラムの形成に寄与します。MAPKおよびNF-κB関連プロセスの制御との関連が示されており、リンパ球の発生や抗原受容体シグナル伝達において、転写出力に影響を及ぼし得ます。TRAF3IP3の発現量や機能の変化は、炎症性シグナルの破綻や血液悪性腫瘍に関連する経路の文脈で研究されており、経路バランスの変動が細胞増殖やアポトーシスに影響する可能性があります。これらの特性により、TRAF3IP3は造血系および免疫由来のモデル系におけるシグナル統合の解明に有用な標的となります。

T3JAM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTRAF3IP3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TRAF3IP3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TRAF3IP3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、T3JAMタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、T3JAMシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TRAF3IP3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• T3JAMの機能に不可欠なTRAF3IP3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TRAF3IP3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• T3JAM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびT3JAM CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TRAF3IP3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  T3JAM HDRプラスミド（h）および T3JAM HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTRAF3IP3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTRAF3IP3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。