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T1R2慢病毒激活颗粒(h) | sc-402555-LAC | 200 µl | $455.00 |
TAS1R2 编码人类甜味受体亚基 T1R2,属于 C 类 GPCR,可与 T1R3 形成异源二聚体以检测糖类和甜味剂。除口腔味觉外,T1R2 还在胃肠道上皮、胰腺等口外组织中表达,参与营养感知,并耦联 GPCR 信号通路,调控细胞内钙离子动态及 cAMP 依赖性过程。通过这些通路,T1R2 可影响与葡萄糖处理及肠内分泌信号相关的分泌与代谢反应。TAS1R2 的表达改变或受体功能异常已在代谢表型研究中受到关注,包括肥胖和糖尿病相关性状,以及更广泛的化学感觉与“肠—脑轴”生物学。
T1R2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 TAS1R2 表达。
T1R2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在TAS1R2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性T1R2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 TAS1R2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。