T-FABP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423411

概要

Fabp9は、精巣脂肪酸結合タンパク質（T-FABP）をコードしており、男性生殖細胞系列において長鎖脂肪酸やその他の疎水性リガンドの細胞内輸送に関与する脂質シャペロンとして知られています。脂肪酸の取り込み、隔離、代謝酵素や膜への受け渡しを調節することで、T-FABPは脂質恒常性の経路と結び付き、精子形成の過程におけるミトコンドリアβ酸化、膜リモデリング、酸化還元（レドックス）バランスに影響を与えます。FABPファミリーの活性変化は一般に代謝異常や炎症性シグナルと関連しており、Fabp9は精子の発生、運動性、不妊・生殖能に関わる表現型の文脈でしばしば研究されています。マウスモデルでは、Fabp9は、生殖細胞の脂質取り扱いが生殖生物学やストレス応答性の代謝適応にどのように影響するかを解析するための扱いやすい検討ポイントとなります。

T-FABP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるFabp9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Fabp9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Fabp9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、T-FABPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、T-FABPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Fabp9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• T-FABPの機能に不可欠なFabp9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Fabp9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• T-FABP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびT-FABP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Fabp9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  T-FABP HDRプラスミド（m）および T-FABP HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFabp9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFabp9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。