T-bet/TBX21 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400480-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- T-bet/TBX21O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase T-bet/TBX21 (h) e o Plasmídeo Double Nickase T-bet/TBX21 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TBX21. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:T-bet/TBX21 Anticorpo (4B10): sc-21749
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
T-bet/TBX21 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400480-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
T-bet/TBX21 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400480-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TBX21 codifica o T-bet, um fator de transcrição da família T-box que orquestra programas imunitários do tipo 1 ao promover a expressão de IFNG e reforçar o compromisso com a linhagem Th1, ao mesmo tempo que antagoniza destinos alternativos de células T auxiliares. O T-bet integra sinais a jusante de vias de citocinas e de recetores de antigénio, incluindo IL-12/STAT4 e IFN-γ/STAT1, para moldar a acessibilidade da cromatina e as redes transcricionais em células T CD4+ e CD8+, bem como em células NK. Por meio do controlo da diferenciação efetora, da função citotóxica e do equilíbrio de citocinas inflamatórias, o TBX21 é amplamente estudado em contextos de infeção crónica, imunobiologia tumoral e doença inflamatória mediada pelo sistema imunitário. A atividade ou expressão desregulada de TBX21 tem sido associada a uma polarização imunitária aberrante e a alterações na inflamação tecidular, tornando-o um nó útil para estudos mecanísticos da regulação imunitária.
T-bet/TBX21 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TBX21 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TBX21. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TBX21. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TBX21 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.