Synoviolin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403476

Visão geral

O gene humano **SYVN1** codifica a **sinoviolina**, uma ligase **E3 de ubiquitina** do tipo **RING**, residente no **retículo endoplasmático (RE)**, que atua como componente central da **degradação associada ao RE (ERAD)**, ubiquitinando proteínas mal dobradas e promovendo a sua eliminação pelo proteassoma. Por meio do controle de qualidade de proteínas no RE, a sinoviolina ajuda a manter a **proteostase** e modula a sinalização da **resposta a proteínas mal dobradas (UPR)**, conectando o estresse do RE a vias inflamatórias e de sobrevivência a jusante. A atividade de **SYVN1** tem sido associada à regulação da **apoptose** e do **controle do ciclo celular** por meio da degradação dependente de ubiquitina de substratos-chave, influenciando a adaptação celular ao estresse crônico. A expressão desregulada de **SYVN1** ou a capacidade alterada de **ERAD** está implicada em mecanismos relevantes para doenças, incluindo **hiperplasia sinovial** e patologia inflamatória articular, bem como em contextos mais amplos de desequilíbrio da proteostase.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Synoviolin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SYVN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SYVN1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SYVN1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Synoviolin.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SYVN1 para a investigação da sinalização de Synoviolin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SYVN1 críticos para a função Synoviolin
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SYVN1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Synoviolin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Synoviolin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SYVN1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Synoviolin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Synoviolin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SYVN1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SYVN1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.