SYND3/SDC3/Syndecan-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423236

Visão geral

Sdc3 codifica a sindecana-3 (SYND3/SDC3), um proteoglicano transmembranar de sulfato de heparano que organiza sinais da matriz extracelular e gradientes de fatores de crescimento na superfície celular. Ao ligar-se a ligantes dependentes de sulfato de heparano, a SDC3 modula a sinalização de receptores tirosina-quinase e de quimiocinas, influenciando a remodelação do citoesqueleto, a migração celular, o crescimento de neuritos e a plasticidade sináptica. Em camundongos, Sdc3 é proeminente em tecidos neuronais e metabólicos e contribui para vias que regulam a orientação axonal, a adesão célula–matriz e a sinalização inflamatória. A desregulação da função da sindecana-3 tem sido associada a processos de neurodesenvolvimento e neuroinflamação, bem como a fenótipos de balanço energético alterado, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas sobre SNC e metabolismo.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SYND3/SDC3/Syndecan-3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sdc3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sdc3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sdc3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SYND3/SDC3/Syndecan-3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sdc3 para a investigação da sinalização de SYND3/SDC3/Syndecan-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sdc3 críticos para a função SYND3/SDC3/Syndecan-3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sdc3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SYND3/SDC3/Syndecan-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SYND3/SDC3/Syndecan-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sdc3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SYND3/SDC3/Syndecan-3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SYND3/SDC3/Syndecan-3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sdc3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sdc3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.