Synaptogyrin-3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423240

Übersicht

Syngr3 kodiert Synaptogyrin‑3, ein tetraspanes Membranprotein synaptischer Vesikel, das in präsynaptischen Endigungen angereichert ist und zur Vesikeltrafficking sowie zur Dynamik der Neurotransmitterfreisetzung beiträgt. Synaptogyrin‑3 ist an regulierter Exozytose und endozytotischen Recyclingprozessen beteiligt, die synaptische Transmission und Plastizität formen, und steht dabei in Wechselwirkung mit der zentralen Maschinerie des synaptischen Vesikelzyklus. Eine veränderte Funktion der Synaptogyrin‑Familie wurde mit Störungen der neuronalen Netzwerkaktivität und der synaptischen Homöostase in Verbindung gebracht, wodurch Syngr3 für Studien zu neuroentwicklungsbezogenen und neurodegenerativen Mechanismen relevant ist. In Mausmodellen eignet sich eine Störung von Syngr3 dazu, präsynaptische Beiträge zu Phänotypen auf Schaltkreisebene und zu aktivitätsabhängiger Signalübertragung zu untersuchen.

Das Synaptogyrin-3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Syngr3-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Syngr3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Syngr3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Synaptogyrin-3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Syngr3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Synaptogyrin-3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Syngr3-Exone abzielen, die für die Synaptogyrin-3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Syngr3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Synaptogyrin-3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Synaptogyrin-3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Syngr3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Synaptogyrin-3 HDR-Plasmid (m) und Synaptogyrin-3 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Syngr3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Syngr3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.