Synapsin IIa CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423234

개요

Syn2는 시냅스 소포 및 액틴과 결합해 소포 클러스터링, 예비 풀(reserve pool) 유지, 그리고 활동 의존적 신경전달물질 방출을 조절하는 시냅스전 인산화 단백질인 시냅신 IIa를 암호화한다. 시냅신 IIa는 PKA, CaMKII, MAPK/ERK를 포함한 신경 신호전달 연쇄 반응의 하위 경로에서 일어나는 인산화에 의해 조절되며, 칼슘 유입과 2차 전달자 경로를 시냅스 가소성과 연결한다. 생쥐 신경계 모델에서는 시냅신 기능의 변화를 이용해 신경발달 및 신경정신 질환 관련 표현형과 연관된 흥분–억제 균형, 네트워크 동기화, 시냅스 성숙의 변화를 연구한다. Syn2의 교란은 회로 안정성과 자극 유발 시냅스 전달에 영향을 미치는 시냅스전 기전을 규명하기 위한 다루기 쉬운 접근법을 제공한다.

Synapsin IIa CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Syn2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Syn2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Syn2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Synapsin IIa 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Synapsin IIa 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Syn2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Synapsin IIa 기능에 중요한 Syn2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Syn2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Synapsin IIa CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Synapsin IIa CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Syn2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Synapsin IIa HDR 플라스미드 (m) 및 Synapsin IIa HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Syn2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Syn2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.