Synapsin Ia/b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423233

Visão geral

Syn1 codifica a sinapsina Ia/b, uma fosfoproteína específica de neurónios que se associa às vesículas sinápticas e ao citoesqueleto de actina para regular o agrupamento de vesículas, a manutenção do pool de reserva e a libertação de neurotransmissores dependente da actividade. A sinapsina Ia/b é modulada por cascatas de fosforilação dependentes de cálcio e de AMPc, ligando a actividade de disparo neuronal à mobilização de vesículas sinápticas e à plasticidade pré-sináptica. Por meio destes processos, Syn1 contribui para a maturação dos circuitos, a estabilidade das sinapses e a plasticidade sináptica de curto prazo que moldam o processamento de informação no sistema nervoso central. Alterações na sinalização da sinapsina têm sido implicadas em fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos e são amplamente estudadas em relação à susceptibilidade a crises convulsivas e à disfunção sináptica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Synapsin Ia/b (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Syn1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Syn1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Syn1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Synapsin Ia/b.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Syn1 para a investigação da sinalização de Synapsin Ia/b, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Syn1 críticos para a função Synapsin Ia/b
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Syn1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Synapsin Ia/b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Synapsin Ia/b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Syn1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Synapsin Ia/b Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Synapsin Ia/b (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Syn1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Syn1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.