SUV420H2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404626

개요

KMT5C는 히스톤 H4의 라이신 20(H4K20)을 삼중 메틸화(H4K20me3)하는 크로마틴 조절 효소인 라이신 메틸전이효소 SUV420H2를 암호화합니다. 이 표지는 이질염색질(heterochromatin)에 풍부하며, 상위 수준의 크로마틴 응축을 촉진하고 복제 타이밍을 조절하며, DNA 수리 경로 선택을 조절함으로써 유전체 안정성을 유지하는 데 기여합니다. SUV420H2의 활성은 후성유전적 침묵화 프로그램 및 세포주기와 연동된 크로마틴 리모델링과 맞물려 작동하여, 반복서열과 계통(라인리지) 특이적 유전자 좌위에서의 전사 억제에 영향을 줍니다. H4K20 메틸화 패턴의 이상과 SUV420H2 발현 변화는 암을 비롯한 유전체 불안정성 상황에서 관찰되는 비정상적 크로마틴 상태와 연관되어 왔으며, 이러한 점에서 KMT5C는 후성유전학 중심의 기전 연구에 유용한 표적(노드)입니다.

SUV420H2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 KMT5C 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 KMT5C 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 KMT5C의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SUV420H2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SUV420H2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 KMT5C 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SUV420H2 기능에 중요한 KMT5C 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 KMT5C 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SUV420H2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 SUV420H2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 KMT5C 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SUV420H2 HDR 플라스미드 (h) 및 SUV420H2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 KMT5C 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 KMT5C 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.