SUV420H1 Plasmide Double Nickase (h): sc-404615-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SUV420H1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SUV420H1 Double Nickase Plasmid (h) e il SUV420H1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira KMT5B. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SUV420H1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404615-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SUV420H1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404615-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KMT5B codifica la metiltransferasi umana delle lisine istoniche SUV420H1, un enzima che catalizza la di- e trimetilazione di H4K20 e contribuisce a stabilire stati di cromatina repressivi. Modellando l’architettura della cromatina di ordine superiore e la memoria epigenetica, SUV420H1 influenza la tempistica di replicazione del DNA, la stabilità del genoma e la riparazione dei danni al DNA, intersecando vie di controllo del ciclo cellulare e di rimodellamento della cromatina. Alterazioni dei pattern di metilazione di H4K20 e una deregolazione dell’attività di SUV420H1 sono state collegate a programmi trascrizionali anomali e all’instabilità genomica osservati in diversi contesti patologici, inclusi il cancro e disturbi del neurosviluppo. Queste caratteristiche rendono KMT5B un bersaglio utile per studiare la regolazione dell’espressione genica dipendente dalla cromatina e il mantenimento dell’integrità dell’epigenoma nelle cellule umane.
SUV420H1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus KMT5B nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di KMT5B. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di KMT5B. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con KMT5B interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.