SUMO-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423588

概要

Sumo1はSUMO-1をコードしており、SUMO-1はユビキチン様修飾因子として標的タンパク質のリシン残基に共有結合的に付加され、局在、安定性、相互作用ネットワークを調節します。SUMO化（SUMOylation）は、E1–E2–E3からなる協調的な酵素カスケードとSUMO特異的プロテアーゼによって制御され、DNA損傷シグナル伝達と修復、クロマチン構造の制御、転写制御、核内輸送、細胞周期進行など、多様な細胞プロセスに影響を与えます。SUMO-1による修飾はしばしばユビキチン依存的な分解やストレス応答経路と交差し、核および細胞質におけるプロテオスタシスとシグナル伝達ダイナミクスを形作ります。SUMO化の制御異常は、がん生物学、神経変性、免疫調節に関わる機構との関連が報告されており、Sumo1はマウスモデルや細胞系で経路レベルの研究を行ううえで有用な結節点となります。

SUMO-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSumo1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Sumo1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Sumo1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SUMO-1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SUMO-1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Sumo1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SUMO-1の機能に不可欠なSumo1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Sumo1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SUMO-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSUMO-1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Sumo1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SUMO-1 HDRプラスミド（m）および SUMO-1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSumo1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSumo1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。