SUGT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405128

概要

SUGT1（SKP1ホモログのG2アレルのサプレッサー）は保存性の高いコシャペロンで、HSP90と相互作用し、細胞周期の進行に中核的な多タンパク質複合体の組み立てと安定性に関与します。キネトコア機能や有糸分裂チェックポイント制御にも関与するとされ、正確な染色体分配と細胞増殖を支えます。さらにSUGT1は、制御されたタンパク質複合体形成を介してNOD1/NOD2依存性経路および下流の炎症応答を調節することで、自然免疫シグナル伝達にも寄与します。SUGT1の発現や機能の異常は、プロテオスタシスの破綻、細胞周期異常、炎症性表現型の変化と関連づけられており、ヒトのモデル系においてがん生物学や免疫関連疾患に関わる現象として報告されています。

SUGT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSUGT1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SUGT1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SUGT1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SUGT1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SUGT1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SUGT1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SUGT1の機能に不可欠なSUGT1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SUGT1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SUGT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびSUGT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SUGT1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SUGT1 HDRプラスミド（h）および SUGT1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSUGT1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSUGT1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。