SUCLA2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423214

개요

Sucla2는 TCA(삼카복실산) 회로에서 ATP 생성과 함께 succinyl-CoA를 succinate로 가역적으로 전환하는 미토콘드리아 기질(matrix) 효소인 succinyl-CoA synthetase(ADP-형성)의 마우스 SUCLA2 베타 소단위를 암호화한다. 이 반응을 통해 SUCLA2는 산화적 대사, 보충대사(anaplerotic) 플럭스, 그리고 TCA 회로와 헴/케톤체 관련 succinyl-CoA 이용 간의 조절 연계를 지원한다. SUCLA2 기능은 미토콘드리아 에너지 항상성과 뉴클레오타이드 균형과 밀접하게 연결되어 있으며, 이 경로의 교란은 SUCLA2 관련 미토콘드리아 질환에서 보고된 미토콘드리아 뇌근육병 양상 및 mtDNA 유지 결함과 연관된다. 따라서 마우스 모델에서 Sucla2는 대사 스트레스 반응, 신경근 취약성, 그리고 TCA 회로 효소와 미토콘드리아 게놈 안정성을 연결하는 기전을 연구하는 데 중요하다.

SUCLA2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sucla2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sucla2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sucla2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SUCLA2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SUCLA2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sucla2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SUCLA2 기능에 중요한 Sucla2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sucla2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SUCLA2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 SUCLA2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sucla2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SUCLA2 HDR 플라스미드 (m) 및 SUCLA2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sucla2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sucla2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.