Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SRm300 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403447
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SRm300 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SRm300, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SRm300 Anticorpo (C-9): sc-390315
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SRm300 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403447 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SRRM2 codifica a SRm300, um grande cofator de splicing rico em serina/arginina que se localiza em speckles nucleares e auxilia a montagem do spliceossoma e o processamento do pré‑mRNA. A SRm300 contribui para decisões de splicing alternativo e coordena o acoplamento entre transcrição e splicing, influenciando a maturação do RNA, a competência de exportação do mRNA e a diversidade do proteoma. Por meio dessas funções, a SRRM2 afeta vias ligadas à regulação do ciclo celular, às respostas a danos no DNA e a programas de expressão gênica adaptativos ao estresse. A desregulação de redes de splicing dependentes de SRRM2 tem sido associada ao uso aberrante de isoformas observado em contextos de câncer e de doenças do neurodesenvolvimento ou neurodegenerativas, tornando-a relevante para estudos mecanísticos do processamento de RNA.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SRm300 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SRRM2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SRRM2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SRRM2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SRm300.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SRRM2 para a investigação da sinalização de SRm300, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SRRM2 críticos para a função SRm300
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SRRM2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SRm300 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SRm300 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SRRM2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SRm300 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SRm300 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SRRM2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SRRM2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.