SphK1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423102

개요

Sphk1은 스핑고신을 인산화해 스핑고신-1-인산(S1P)을 생성하는 핵심 지질 키나아제인 스핑고신 키나아제 1(SphK1)을 암호화하며, 이를 통해 생존 촉진성 S1P와 세포사멸 촉진성 세라마이드/스핑고신 풀 사이의 균형을 조절합니다. SphK1에 의해 유도되는 S1P 신호는 GPCR 및 수용체 티로신 키나아제 경로와 교차하여 MAPK/ERK, PI3K/AKT, NF-κB, 칼슘 플럭스, 세포골격 재구성에 영향을 주고, 이들 신호는 함께 증식, 세포사멸 저항성, 이동, 염증 반응을 조절합니다. 마우스 연구에서는 SphK1이 면역 조절, 혈관 생물학, 스트레스 반응에서의 생체활성 스핑고지질 대사를 탐구하는 데 널리 활용되며, 염증, 섬유화, 암 관련 표현형 모델을 포함합니다. SPHK1/S1P 축의 활성 변화는 사이토카인 생성, 장벽 기능, 종양 연관 신호의 이상과 자주 연관되므로, 기전적 경로 연구에서 중요한 노드로 간주됩니다.

SphK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sphk1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sphk1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sphk1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SphK1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SphK1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sphk1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SphK1 기능에 중요한 Sphk1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sphk1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SphK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 SphK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sphk1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SphK1 HDR 플라스미드 (m) 및 SphK1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sphk1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sphk1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.