Sp9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436278

Visão geral

Sp9 (fator de transcrição Sp9) é um membro da família Sp/KLF de proteínas que se ligam a caixas GC e regulam programas de expressão gênica que controlam decisões de destino celular durante o desenvolvimento embrionário. Em camundongos, a atividade de Sp9 tem sido associada a processos de padronização e diferenciação no sistema nervoso central e nos membros, nos quais coordena redes transcricionais que influenciam a proliferação de progenitores e a morfogênese dos tecidos. Como regulador nuclear que se liga ao DNA, Sp9 se integra a contextos mais amplos de sinalização do desenvolvimento, incluindo vias que convergem na arquitetura de enhancers e promotores para ajustar a transcrição específica de linhagem. A disfunção de fatores de transcrição do desenvolvimento é frequentemente associada a fenótipos congênitos e defeitos do neurodesenvolvimento, tornando Sp9 um alvo útil para estudos mecanísticos de circuitos de regulação gênica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sp9 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sp9 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sp9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sp9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sp9.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sp9 para a investigação da sinalização de Sp9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sp9 críticos para a função Sp9
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sp9 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Sp9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Sp9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sp9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Sp9 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Sp9 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sp9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sp9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.