Sos 1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423075-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sos 1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Sos 1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Sos 1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Sos1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sos 1 Anticorpo (A-9): sc-17793
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sos 1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-423075-NIC | 20 µg | $410.00 |
O SOS1 de camundongo (Son of sevenless homolog 1) é um fator de troca de nucleotídeos de guanina (GEF) específico para Ras que converte Ras-GDP em Ras-GTP a jusante de receptores tirosina-quinase ativados. Por meio do recrutamento à membrana plasmática mediado por GRB2, o SOS1 impulsiona a sinalização pela cascata RAS–RAF–MEK–ERK e contribui para a modulação da via PI3K–AKT, conectando sinais de fatores de crescimento à proliferação, diferenciação e remodelamento do citoesqueleto. O Sos1 também participa do controle por retroalimentação da sinalização de MAPK e ajuda a coordenar a dinâmica da sinalização de receptores em múltiplos tecidos. A atividade desregulada da via SOS1–RAS é amplamente relevante para a biologia da sinalização oncogênica e para fenótipos do desenvolvimento associados à regulação aberrante de Ras/MAPK, tornando o Sos1 um nó-chave para estudos mecanísticos.
Sos 1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Sos1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Sos1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Sos1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Sos1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.