Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
SNX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427326
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SNX5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SNX5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SNX5 Anticorpo (F-11): sc-515215
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SNX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-427326 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Snx5 codifica a sorting nexin 5 (SNX5), um adaptador contendo domínio PX que se liga a membranas endossomais enriquecidas em fosfoinositídeos e participa da triagem endossomal e da tubulação de membranas. A SNX5 atua em vias de tráfego e reciclagem de receptores, incluindo processos coordenados com complexos associados ao retromer e ao SNX-BAR, que moldam os transportadores endossomais e regulam a recuperação de cargas a partir de endossomos precoces. Ao controlar o turnover de receptores e a duração da sinalização, a SNX5 influencia o transporte vesicular, a polarização celular e a homeostase de membranas. Redes de tráfego endocítico desreguladas envolvendo sorting nexins têm sido associadas à neurodegeneração, à reprogramação de sinalização relacionada ao câncer e à disfunção imune, tornando o Snx5 um nó útil para pesquisas focadas em vias em modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SNX5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Snx5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Snx5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Snx5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SNX5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Snx5 para a investigação da sinalização de SNX5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Snx5 críticos para a função SNX5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Snx5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SNX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SNX5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Snx5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SNX5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SNX5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Snx5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Snx5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.