Plasmide Double Nickase (h) SNM1A: sc-411393-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SNM1A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SNM1A Double Nickase (h) et le plasmide SNM1A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DCLRE1A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SNM1A | sc-411393-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SNM1A | sc-411393-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCLRE1A code pour SNM1A, une exonucléase 5′–3′ de la famille des métallo-β-lactamases qui favorise la réparation des pontages interbrins de l’ADN et d’autres lésions susceptibles de bloquer les fourches de réplication. SNM1A agit en aval de la voie de l’anémie de Fanconi et coopère avec des endonucléases spécifiques de structure pour traiter des intermédiaires d’ADN issus des pontages, soutenant ainsi une réparation couplée à la réplication et la stabilité du génome. En limitant le stress réplicatif et les aberrations chromosomiques, SNM1A contribue aux réponses cellulaires aux dommages génotoxiques et au maintien de la capacité proliférative. Une activité altérée de DCLRE1A/SNM1A a été associée à une tolérance diminuée aux dommages de l’ADN et à une susceptibilité à des phénotypes d’instabilité génomique pertinents pour la biologie du cancer et certaines maladies héréditaires de réparation de l’ADN.
SNM1A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DCLRE1A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DCLRE1A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DCLRE1A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DCLRE1A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.