SNAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-430613

概要

Slc38a1 は、ナトリウム共役型中性アミノ酸トランスポーター1（SNAT1）をコードしており、SNAT1 はシステムA型トランスポーターとして、グルタミン、アラニン、セリンなどの小型中性アミノ酸を Na⁺ 依存的に細胞膜を介して取り込む働きを担います。SNAT1 は細胞内アミノ酸の利用可能性を調節することで、細胞の窒素バランス、レドックス恒常性、ならびにアミノ酸感受性の mTORC1 制御を含む代謝シグナル伝達プログラムに寄与します。マウス組織では、SNAT1 活性は神経細胞およびグリア細胞におけるアミノ酸の取り扱いに特に重要で、神経伝達物質の回転（サイクル）やエネルギー需要の支援に関与します。中性アミノ酸輸送の変化は、代謝ストレス応答や神経生物学関連の表現型と関連づけられており、Slc38a1 は栄養輸送とシグナル伝達のクロストークを研究する上で有用な標的となります。

SNAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSlc38a1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Slc38a1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Slc38a1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、SNAT1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、SNAT1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Slc38a1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• SNAT1の機能に不可欠なSlc38a1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Slc38a1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• SNAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびSNAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Slc38a1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  SNAT1 HDRプラスミド（m）および SNAT1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSlc38a1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSlc38a1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。