SNAP47 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-410264

개요

SNAP47은 SNARE(SNAP receptor) 계열 단백질을 암호화하며, 상동(synatxin 및 VAMP) 단백질들과 결합해 외배출(exocytosis)과 엔도멤브레인(세포내막계) 수송을 조절함으로써 소포 도킹과 막 융합에 관여합니다. 또한 신경전달물질 방출과 조절성 화물(cargo) 전달 등 특수화된 분비 경로에 연관된 것으로 보고되어, SNAP47의 활성이 시냅스 소포 순환, 막 재활용, 단백질 위치의 공간적 제어와 연결됩니다. SNARE 복합체의 동역학에서 수행하는 역할을 통해 SNAP47은 신경돌기(neurite) 신장, 수용체 수송, 자극-연동 분비(stimulus-coupled secretion) 같은 세포 과정에 영향을 미칩니다. 소포 수송 이상과 시냅스 신호전달의 이상은 신경발달 및 신경퇴행 연구 맥락에서 중요하므로, SNAP47은 수송 의존적 표현형을 규명하는 데 유용한 표적이 됩니다.

SNAP47 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SNAP47 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SNAP47 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SNAP47의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SNAP47 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SNAP47 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SNAP47 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SNAP47 기능에 중요한 SNAP47 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SNAP47 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SNAP47 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 SNAP47 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SNAP47 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SNAP47 HDR 플라스미드 (h) 및 SNAP47 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SNAP47 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SNAP47 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.