Smurf2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-425947

개요

Smurf2(SMAD 특이적 E3 유비퀴틴 단백질 리가아제 2)는 HECT형 E3 유비퀴틴 리가아제로, TGF-β/BMP 및 Wnt 신호전달을 포함한 여러 경로에서 단백질 분해(turnover)와 신호 강도를 조절합니다. Smurf2는 수용체-조절 SMADs와 관련 신호 구성요소 같은 기질을 유비퀴틴화함으로써, 증식, 분화, 상피–간엽 가소성을 조절하는 전사 프로그램을 제어하는 데 기여합니다. 또한 Smurf2는 DNA 손상 및 체크포인트 관련 단백질의 조절을 통해 유전체 안정성과 세포 스트레스 반응에도 관여합니다. Smurf2 활성의 이상 조절은 조직 항상성 변화 및 암과 관련된 표현형(성장 조절 변화, 섬유화 연관 신호, 전이성 형질 등)과 연결되어 왔으며, 마우스 모델에서 기전 연구를 위한 유용한 핵심 노드로 여겨집니다.

Smurf2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Smurf2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Smurf2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Smurf2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Smurf2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Smurf2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Smurf2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Smurf2 기능에 중요한 Smurf2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Smurf2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Smurf2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Smurf2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Smurf2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Smurf2 HDR 플라스미드 (m) 및 Smurf2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Smurf2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Smurf2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.