Partículas Lentivirales de Activación (h) Slfn11: sc-401137-LAC

El gen humano **SLFN11** codifica el miembro 11 de la familia Schlafen (Slfn11), un factor asociado a la respuesta al daño del ADN que influye en la tolerancia al estrés replicativo y en el destino celular tras una agresión genotóxica. SLFN11 se ha vinculado a la regulación de horquillas de replicación detenidas, los conflictos transcripción–replicación y la señalización de puntos de control, integrándose con vías que determinan la progresión de la fase S y la integridad del genoma. A través de sus efectos sobre procesos asociados a la cromatina y programas transcripcionales sensibles al estrés, SLFN11 puede modular la sensibilidad celular a agentes que inducen lesiones en el ADN. La alteración de la expresión o la función de SLFN11 se ha estudiado en el contexto de la biología tumoral y de los mecanismos que subyacen a fenotipos de resistencia en modelos de investigación dirigidos al daño del ADN.

Las partículas de activación lentiviral Slfn11 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de SLFN11 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Slfn11 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción SLFN11, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Slfn11. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo SLFN11 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.