SLC25A29 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406645

Visão geral

SLC25A29 (membro 29 da família de transportadores de solutos 25) codifica um transportador da membrana interna mitocondrial envolvido no transporte de aminoácidos básicos, particularmente a arginina, para a matriz mitocondrial, a fim de sustentar o fluxo metabólico através da rede arginina/ornitina ligada ao ciclo da ureia e do metabolismo relacionado ao óxido nítrico. Ao modular a disponibilidade intramitocondrial de aminoácidos, o SLC25A29 pode influenciar a respiração mitocondrial, o equilíbrio redox e vias biossintéticas que dependem do metabolismo de um carbono e do manuseio de nitrogênio. Alterações na expressão ou na atividade de transportadores mitocondriais da família SLC25 são frequentemente associadas à reprogramação metabólica e à disfunção mitocondrial observadas em diversos contextos de doença, tornando o SLC25A29 um alvo útil para estudos mecanísticos do transporte mitocondrial de aminoácidos. Pesquisas sobre o SLC25A29 também ajudam a entender como a partição de substratos na mitocôndria impacta as respostas celulares ao estresse e a homeostase energética.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SLC25A29 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC25A29 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC25A29, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC25A29 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SLC25A29.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC25A29 para a investigação da sinalização de SLC25A29, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC25A29 críticos para a função SLC25A29
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC25A29 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SLC25A29 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SLC25A29 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC25A29. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SLC25A29 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SLC25A29 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC25A29 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC25A29 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.