SLC25A18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413500
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SLC25A18 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SLC25A18, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SLC25A18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-413500 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SLC25A18 codifica um transportador da membrana interna mitocondrial da família SLC25, implicado no transporte de glutamato através da membrana mitocondrial, dando suporte ao fluxo de nitrogênio entre o citosol e as mitocôndrias. Ao modular a disponibilidade mitocondrial de aminoácidos, o SLC25A18 contribui para a homeostase bioenergética, o equilíbrio redox e o aporte anaplerótico ao ciclo do TCA, influenciando assim as respostas celulares ao estresse nutricional. Alterações no manuseio do glutamato na mitocôndria são relevantes para o remodelamento metabólico e para vias de estresse oxidativo frequentemente estudadas na biologia do câncer e em disfunções neurometabólicas. Assim, o SLC25A18 é utilizado como uma ferramenta investigativa para o transporte mitocondrial de substratos, o metabolismo de aminoácidos e redes de sinalização centradas na mitocôndria.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SLC25A18 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLC25A18 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLC25A18, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLC25A18 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SLC25A18.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLC25A18 para a investigação da sinalização de SLC25A18, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLC25A18 críticos para a função SLC25A18
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLC25A18 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SLC25A18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SLC25A18 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLC25A18. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SLC25A18 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SLC25A18 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLC25A18 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLC25A18 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.