SKT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-431571

개요

마우스 Etl4는 SKT 단백질을 암호화하며, 아직 충분히 규명되지 않았지만 유전자 발현과 세포 항상성을 조절하는 세포 고유(cell-intrinsic) 조절 프로그램에 기여할 것으로 예측되는 인자입니다. 현재 이용 가능한 주석(annotation)은 SKT가 증식, 분화, 스트레스 적응 반응과 같은 기본 과정에 관여함을 시사하며, 이는 발달 및 조직 유지 경로에서의 역할과도 일치합니다. 이러한 조절자는 신호 경로의 연결 구조와 표현형 안정성에 영향을 줄 수 있으므로, SKT를 교란하는 것은 조절되지 않은 성장과 변화된 계통 프로그램 등 질환 관련 세포 상태의 기저 메커니즘을 탐구하는 데 유용합니다. Etl4/SKT 기능 상실 모델은 마우스 세포 및 생체(in vivo) 환경에서 하위 전사 및 신호전달 결과를 지도화하는 데 도움을 줍니다.

SKT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Etl4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Etl4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Etl4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SKT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SKT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Etl4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SKT 기능에 중요한 Etl4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Etl4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SKT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 SKT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Etl4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SKT HDR 플라스미드 (m) 및 SKT HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Etl4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Etl4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.