SIRT2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-425703

개요

Sirt2는 NAD⁺ 의존성 탈아세틸화효소인 SIRT2를 암호화하며, SIRT2는 주로 세포질에 존재하는 서투인(sirtuin)으로 미세소관 역학, 세포주기 진행, 대사 항상성에 관여하는 단백질들의 아세틸화를 조절합니다. SIRT2는 유사분열 체크포인트 조절, 자가포식, 산화 스트레스 반응을 포함한 핵심 과정들을 조절하여, 영양 감지를 미토콘드리아 및 세포골격 기능과 연결합니다. 마우스 시스템에서 SIRT2 활성은 신경퇴행, 염증, 대사 이상과 관련된 경로들과 연관되어 있어, 조직 특이적 스트레스 회복탄력성을 탐구하는 데 유용한 노드로 여겨집니다. SIRT2 의존적 탈아세틸화의 변화는 전사 프로그램과 단백질 항상성(proteostasis) 네트워크에 영향을 줄 수 있으며, 이는 생체(in vivo) 및 1차 세포 모델에서 노화 관련 표현형에 대한 취약성을 형성하는 데 기여합니다.

SIRT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sirt2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sirt2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sirt2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 SIRT2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 SIRT2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sirt2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• SIRT2 기능에 중요한 Sirt2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sirt2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• SIRT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 SIRT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sirt2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  SIRT2 HDR 플라스미드 (m) 및 SIRT2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sirt2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sirt2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.