SIRT1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400085-NIC

SIRT1은 NAD⁺ 의존성 단백질 탈아세틸화효소를 암호화하며, 대사, 스트레스 적응, 유전체 유지에 관여하는 전사 프로그램을 조율합니다. SIRT1은 p53, FOXO 계열 인자, NF-κB, PGC-1α 등의 기질을 탈아세틸화함으로써 DNA 손상 반응, 미토콘드리아 생합성, 자가포식, 염증성 신호전달과 연관된 경로를 조절합니다. 또한 SIRT1 활성은 NAD⁺의 가용성을 통해 세포 에너지 상태와 긴밀히 연결되어 있으며, AMPK–mTOR 및 인슐린/IGF 신호 네트워크와의 상호작용(크로스토크)을 통해 조절됩니다. SIRT1 신호의 조절 이상은 노화 관련 표현형의 변화와 연관된 것으로 보고되어 왔고, 대사 질환, 신경퇴행, 종양 생물학 등 다양한 맥락에서 연구되어 왔습니다.

SIRT1 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 SIRT1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 SIRT1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 SIRT1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, SIRT1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.